紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)光度準(zhǔn)確度測(cè)試方法
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)光度準(zhǔn)確度測(cè)試方法
用于紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度測(cè)試的材料, 應(yīng)該是純度高、穩(wěn)定性好的物質(zhì)。這些物質(zhì)中最主要的是鉻酸鉀( K2 CrO4 , 一般在堿性溶液中)、重鉻酸鉀( K2 Cr2 O7 , 一般在酸性溶液中) 、硝酸鉀、中性濾光片等。在堿性溶液中的鉻酸鉀是一種好材料, 但是因?yàn)楹袎A性, 不能儲(chǔ)藏在普通玻璃容器中, 而需要儲(chǔ)藏在石英器皿中, 硝酸鉀本身不大穩(wěn)定。這些都限制了它們的使用。因此, 最好選擇易于純化又溶于酸性介質(zhì)中的物質(zhì), 并且它們的稀溶液也是很穩(wěn)定的。因此, 重鉻酸鉀的0. 005mol/ L H2 SO4 溶液經(jīng)常被使用。許多科學(xué)家認(rèn)為, 用紫外濾光片來(lái)測(cè)試紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度, 具有很大的優(yōu)點(diǎn)。因?yàn)樗鼈兊姆€(wěn)定性更好, 又便于攜帶, 還有許多優(yōu)點(diǎn)將在后面討論。紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度測(cè)試方法, 目前國(guó)內(nèi)外各生產(chǎn)廠家作法不一, 其主要原因是各國(guó)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)不同; 如美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定: “選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)參比材料, 在規(guī)定的波長(zhǎng)處, 連續(xù)測(cè)10 個(gè)吸光度或透射比讀數(shù), 取10個(gè)讀數(shù)的平均值, 實(shí)際吸光度或透射比與觀測(cè)值的平均值之差, 即為光度準(zhǔn)確度”。美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)還規(guī)定了計(jì)算光度準(zhǔn)確度的標(biāo)準(zhǔn)偏差S 的方法; 規(guī)定指出吸光度準(zhǔn)確度用AA 表示, 則有式( 4-10) 、式( 4-11) 中, S 為標(biāo)準(zhǔn)偏差; Ai 或T i 為每次測(cè)量時(shí)吸光度或透射比的讀數(shù)值; Aa 或Ta 為吸光度或透射比的平均值; n 為測(cè)量次數(shù)( 一般取5～7 次)。
美國(guó)NBS 規(guī)定, 在可見(jiàn)區(qū)用930 標(biāo)準(zhǔn)片來(lái)測(cè)定光度準(zhǔn)確度, 其標(biāo)準(zhǔn)透射比值分別為10%、20%、30%的中性玻璃濾光片。規(guī)定還指出也可用NBS 的931 , 它是一種溶液。而在紫外區(qū)內(nèi), 則規(guī)定用NBS 的203 來(lái)測(cè)定光度準(zhǔn)確度; 它是一種標(biāo)準(zhǔn)透射比值分別為90%、30%、10% 熔融石英濾光片。此外,美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)還規(guī)定在紫外區(qū)內(nèi), 用戶還可以自己配置高純度的化合物溶液來(lái)測(cè)定光度準(zhǔn)確度。為此, 美國(guó)NBS 已發(fā)布了鉻酸鉀(K2 CrO4 )、重鉻酸鉀( K2 Cr2 O7 )等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可供選用。
我國(guó)在1992 年制訂的紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定, 用重鉻酸鉀溶液來(lái)測(cè)試紫外區(qū)的光度準(zhǔn)確度, 并明確指出了測(cè)試波長(zhǎng)。在可見(jiàn)光區(qū)規(guī)定可用中性濾光片來(lái)檢測(cè)光度準(zhǔn)確度, 其標(biāo)準(zhǔn)片的透射比值分別為10%、20%、40%左右; 同時(shí)還規(guī)定在紫外可見(jiàn)整個(gè)區(qū)間, 都可用中性濾光片來(lái)檢測(cè)光度準(zhǔn)確度, 其標(biāo)準(zhǔn)片的透射比值也分別為10%、20%、40%左右。
安徽省計(jì)量測(cè)試研究所和國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心共同研制的紫外光區(qū)透射比標(biāo)準(zhǔn)濾光片, TA 優(yōu)于0. 2% , 穩(wěn)定性優(yōu)于0. 1% , 其測(cè)試波長(zhǎng)分別為270nm、293 nm 和350 nm, 相應(yīng)的透射比標(biāo)準(zhǔn)值各為11. 4%、3. 9%、52. 9%左右。用來(lái)測(cè)試日本島津公司的UV-260 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)和無(wú)錫高速分析儀器廠生產(chǎn)的WFZ-753 型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度, 具體操作時(shí),以空氣作參照, 對(duì)規(guī)定的波長(zhǎng)處各測(cè)7 次, 取其平均值, 與標(biāo)準(zhǔn)值相減, 則得到各規(guī)定的波長(zhǎng)處的TA 。而后, 取三個(gè)規(guī)定波長(zhǎng)中最差者作為被測(cè)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)儀器的透射比準(zhǔn)確度。再根據(jù)式( 4-2 ) , 求得被測(cè)儀器在各規(guī)定的波長(zhǎng)處的透射比準(zhǔn)確度, 然后以三個(gè)規(guī)定波長(zhǎng)中的最差者作為被測(cè)儀器的透射比準(zhǔn)確度。
影響紫外分光光度計(jì)光度準(zhǔn)確度的因素很多, 主要因素有雜散光、噪聲、基線平直度、光譜帶寬等, 將在后面討論。
